immunoblot
Immunoblot, znany również jako Western blot, to technika laboratoryjna stosowana w diagnostyce medycznej i badaniach naukowych do identyfikacji i analizy białek w złożonych mieszaninach. Metoda ta polega na rozdzieleniu białek za pomocą elektroforezy, a następnie przeniesieniu ich na membranę (najczęściej nitrocelulozową lub PVDF) i detekcji specyficznych białek przy użyciu znakowanych przeciwciał.
W diagnostyce medycznej immunoblot ma szerokie zastosowanie w wykrywaniu przeciwciał specyficznych dla określonych patogenów, co jest szczególnie istotne w diagnostyce chorób infekcyjnych, takich jak borelioza, HIV czy wirusowe zapalenie wątroby. Technika ta jest również wykorzystywana do potwierdzenia rozpoznania chorób autoimmunologicznych poprzez identyfikację autoprzeciwciał oraz w diagnostyce chorób prionowych.
Immunoblot charakteryzuje się wysoką swoistością, ponieważ umożliwia identyfikację konkretnych białek na podstawie ich masy cząsteczkowej, co pozwala na redukcję wyników fałszywie dodatnich. W wielu algorytmach diagnostycznych pełni rolę testu potwierdzającego po wstępnych badaniach przesiewowych metodą ELISA. Interpretacja wyników immunoblotu wymaga specjalistycznej wiedzy i doświadczenia, gdyż wzorce prążków mogą być złożone i zależne od wielu czynników.
Powiązane wpisy
- Leksykon chorób i schorzeń
Tasiemczyca – Diagnostyka i diagnoza
Diagnostyka tasiemczycy opiera się na wieloaspektowym podejściu, uwzględniającym badania kału, serologiczne oraz obrazowe, dostosowanych do postaci klinicznej i lokalizacji pasożyta. W przypadku tasiemczycy jelitowej podstawą jest mikroskopowe badanie 2-3 próbek kału pobranych w różnych dniach, celem wykrycia jaj lub segmentów tasiemca, z uwzględnieniem, że jaja pojawiają się zwykle 2-3 miesiące po zakażeniu. Badanie koproantygenowe wykazuje czułość 98% i swoistość 99%, przewyższając mikroskopię (czułość 38%), a metody molekularne (PCR) pozwalają na identyfikację gatunku z czułością 97-100% i swoistością do 100%. W diagnostyce cysticerkozy kluczowe są testy serologiczne, zwłaszcza immunoblot (EITB) o czułości i swoistości odpowiednio 100% i 98%, oraz badania obrazowe (CT, MRI, USG) umożliwiające wykrycie torbieli, zwapnień i zmian obrzękowych w mózgu i tkankach miękkich.
anemia megaloblastyczna, bąblowica, badanie kału, bruzdogłowiec szeroki, cysticerkoza, Diphyllobothrium latum, dysfagia, Echinococcus granulosus, ELISA, immunoblot, neurocysticerkoza, padaczka, PCR, płyn mózgowo-rdzeniowy, rezonans magnetyczny, Taenia saginata, Taenia solium, tasiemczyca, tasiemiec nieuzbrojony, tasiemiec uzbrojony, tomografia komputerowa, torbiel bąblowcowa, ultrasonografia, wodogłowie - Leksykon chorób i schorzeń
Toxoplazmoza – Diagnostyka i diagnoza
Toksoplazmoza, wywołana przez Toxoplasma gondii, wymaga kompleksowej diagnostyki obejmującej metody serologiczne, molekularne, obrazowe oraz histopatologiczne. Diagnostyka serologiczna opiera się na oznaczaniu przeciwciał IgG i IgM, gdzie obecność IgM wskazuje na ostre zakażenie, a test awidności IgG pozwala różnicować czas zakażenia. Metody molekularne, zwłaszcza PCR z wykorzystaniem genów B1 i sekwencji 529 bp, są kluczowe w diagnostyce prenatalnej, toksoplazmozy OUN oraz ocznej, charakteryzując się wysoką czułością i swoistością (PCR w płynie owodniowym: czułość 92%, swoistość 100%). Badania obrazowe (TK, MRI, USG) wspomagają diagnozę i monitorowanie, szczególnie u pacjentów z AIDS i wrodzoną toksoplazmozą, gdzie obserwuje się zmiany pierścieniowate i zwapnienia wewnątrzczaszkowe. Diagnostyka histopatologiczna, choć rzadziej stosowana, umożliwia identyfikację tachyzoitów i cyst tkankowych, zwłaszcza przy użyciu barwienia immunoperoksydazowego.
amniopunkcja, autofluorescencja, badanie histopatologiczne, biomarkery immunologiczne, diagnostyka molekularna, diagnostyka serologiczna, immunoblot, limfocyty CD4, martwicze zapalenie siatkówki, obniżona odporność, paracenteza, płyn mózgowo-rdzeniowy, płyn owodniowy, przeciwciała IgG i IgM, punkcja lędźwiowa, reakcja łańcuchowa polimerazy, reaktywacja zakażenia, real-time PCR, rezonans magnetyczny, tachyzoity, test ELISA, test IGRA, test immunofluorescencyjny, test point-of-care, toksoplazmoza mózgu, toksoplazmoza oczna, toksoplazmoza OUN, tomografia komputerowa, Toxoplasma gondii, ultrasonografia, wodogłowie, wrodzona toksoplazmoza, zahamowanie wzrostu wewnątrzmacicznego, zakażenie pasożytnicze, zakażenie wewnątrzmaciczne, zwapnienia wewnątrzczaszkowe - Leksykon chorób i schorzeń
Borelioza – Diagnostyka i diagnoza
Borelioza, wywoływana przez Borrelia burgdorferi i przenoszona przez kleszcze Ixodes, stanowi wyzwanie diagnostyczne ze względu na niespecyficzne objawy i ograniczenia testów laboratoryjnych. Rozpoznanie opiera się przede wszystkim na wywiadzie epidemiologicznym, badaniu fizykalnym oraz ocenie klinicznej, z kluczowym znaczeniem rumienia wędrującego (erythema migrans, EM), który u pacjentów z obszarów endemicznych jest patognomoniczny i pozwala na rozpoczęcie leczenia bez konieczności potwierdzenia serologicznego. Testy serologiczne, głównie dwustopniowa strategia CDC (ELISA + Western blot) lub modyfikowana (MTTT), wykrywają przeciwciała IgM i IgG, jednak ich czułość zależy od stadium choroby: we wczesnym stadium (1-4 tygodnie) wynosi 35-50%, w stadium rozsianym 70-90%, a w późnym 95-100%. Przeciwciała IgM pojawiają się 2-4 tygodnie po zakażeniu, IgG 4-6 tygodni, a ich interpretacja wymaga uwzględnienia czasu trwania objawów, gdyż dodatni wynik IgM po 30 dniach może być fałszywie dodatni.
acrodermatitis chronica atrophicans, badanie fizykalne, Borrelia burgdorferi, erythema migrans, hodowla bakterii, immunoblot, neuroborelioza, PCR, płyn mózgowo-rdzeniowy, płyn stawowy, późna borelioza, przeciwciała IgG, przeciwciała IgM, reakcja łańcuchowa polimerazy, rumień wędrujący, test ELISA, test point-of-care, Western blot, wynik fałszywie dodatni, wynik fałszywie ujemny - Leksykon chorób i schorzeń
Cyklosporoza – Epidemiologia
Cyklosporoza, wywoływana przez pierwotniaka Cyclospora cayetanensis, stanowi rosnące wyzwanie zdrowia publicznego, szczególnie w regionach tropikalnych i subtropikalnych, gdzie częstość występowania sięga do 24,2% (np. w Wenezueli). W USA choroba jest zgłaszana od 1999 roku, z roczną liczbą przypadków sięgającą 2 272 w 2023 roku. Transmisja odbywa się głównie drogą fekalno-oralną, z zakażeniami związanymi przede wszystkim z zanieczyszczoną żywnością (np. świeże warzywa liściaste, zioła) oraz wodą i glebą. Diagnostyka opiera się na mikroskopii i coraz częściej na metodach molekularnych (PCR w czasie rzeczywistym), co przyczyniło się do wzrostu wykrywalności przypadków. Epidemiologia wskazuje na sezonowość zachorowań, z nasileniem w okresie od maja do sierpnia w USA oraz korelacją z porą deszczową w krajach endemicznych. Nadzór epidemiologiczny prowadzony jest przez CDC i inne agencje, wykorzystując systemy takie jak NNDSS, FoodNet i FDOSS, co umożliwia identyfikację ognisk epidemicznych i monitorowanie trendów.
biegunka, choroba endemiczna, cyklosporoza, czynniki ryzyka, dawka zakaźna, dochodzenie epidemiologiczne, droga fekalno-oralna, genotypowanie, immunoblot, metody diagnostyczne, mikroskopia, nadzór epidemiologiczny, obniżona odporność, obowiązek zgłaszania, obszar endemiczny, oocysty, PCR w czasie rzeczywistym, pierwotniaki pasożytnicze, sekwencjonowanie genetyczne, sezonowość zachorowań, sporulacja, systemy nadzoru - Leksykon chorób i schorzeń
Schistosomatoza (bilharcjoza) – Diagnostyka i diagnoza
Schistosomiasis to choroba pasożytnicza wywoływana przez przywry z rodzaju Schistosoma, diagnozowana głównie poprzez badanie mikroskopowe kału i/lub moczu w celu wykrycia jaj pasożyta. W przypadku S. haematobium badanie moczu (pobierane najlepiej między 10:00 a 14:00, ostatnie 10-20 ml) jest preferowane, natomiast dla S. mansoni, S. japonicum, S. mekongi i S. intercalatum stosuje się badanie kału, najczęściej techniką Kato-Katz, umożliwiającą ocenę intensywności infekcji (liczba jaj na gram kału – EPG). Diagnostyka parazytologiczna cechuje się wysoką specyficznością, ale ograniczoną czułością, zwłaszcza przy niskim obciążeniu pasożytniczym i w początkowych fazach zakażenia (jaja pojawiają się po 6-8 tygodniach). W diagnostyce uzupełniającej stosuje się testy serologiczne (ELISA, FMI, IB, FAST ELISA, IHA) oraz testy antygenowe wykrywające krążące antygeny (CAA i CCA), które odzwierciedlają aktywną infekcję i szybko reagują na leczenie (np. spadek CCA w moczu już następnego dnia po terapii). Metody molekularne, takie jak real-time PCR, LAMP, RPA i techniki oparte na CRISPR, oferują wysoką czułość i specyficzność, umożliwiając wykrycie DNA pasożyta nawet przy niskim obciążeniu, jednak ich stosowanie jest ograniczone przez koszty i wymagania sprzętowe.
badanie parazytologiczne, badanie serologiczne, biopsja błony śluzowej, biopsja tkanki, immunoblot, LAMP, neuroschistosomiasis, ostra schistosomiasis, PCR, przywra Schistosoma, real-time PCR, RPA, Schistosoma haematobium, Schistosoma mansoni, schistosomiasis, schistosomiasis jelitowa, schistosomiasis moczowo-płciowa, serokonwersja, technika Kato-Katz, technika molekularna, test ELISA, włóknienie okołowrotne, zespół Katayama - Leksykon chorób i schorzeń
Toxokarioza – Diagnostyka i diagnoza
Diagnostyka toksokarozy opiera się głównie na badaniach serologicznych, zwłaszcza testach immunoenzymatycznych (ELISA) wykorzystujących antygeny wydzielniczo-wydalnicze larw (TES). Miano końcowe ≥1:32 uznaje się za dodatnie, z czułością 78% dla larwy wędrującej trzewnej (VLM) i 73% dla larwy wędrującej ocznej (OLM), oraz swoistością około 91-92%. Eozynofilia obwodowa i podwyższony poziom IgE są istotnymi markerami laboratoryjnymi, choć eozynofilia może być nieobecna w toksokarozie ocznej. Diagnostyka OLM opiera się na badaniu okulistycznym, serologii surowicy i płynu komorowego oka, a także obrazowaniu (OCT, USG B, MRI). Immunoblot (Western blot) jest stosowany do potwierdzenia wyników ELISA, redukując fałszywie dodatnie wyniki. Diagnostyka molekularna (PCR) umożliwia identyfikację larw w tkankach, choć jest rzadko stosowana klinicznie ze względu na trudności w pobraniu materiału.
albendazol, angiografia fluoresceinowa, antygen wydzielniczo-wydalniczy, badanie obrazowe, badanie okulistyczne, białko kationowe eozynofilów, diagnostyka molekularna, diagnostyka różnicowa, eozynofilia obwodowa, immunoblot, miano przeciwciał, optyczna koherentna tomografia, płyn mózgowo-rdzeniowy, test immunoenzymatyczny, toksokaroza oczna, toksokaroza trzewna, zapalenie ciała szklistego, zapalenie wewnątrzgałkowe