ilościowa PCR

Ilościowa PCR (qPCR – quantitative Polymerase Chain Reaction) to zaawansowana technika diagnostyczna będąca modyfikacją klasycznej reakcji łańcuchowej polimerazy, która umożliwia jednoczesną amplifikację i pomiar ilości specyficznych fragmentów DNA w czasie rzeczywistym. Metoda ta opiera się na detekcji sygnału fluorescencyjnego, którego intensywność jest proporcjonalna do ilości powstającego produktu PCR.

W przeciwieństwie do konwencjonalnej PCR, ilościowa PCR pozwala nie tylko na wykrycie obecności poszukiwanej sekwencji DNA, ale również na określenie jej wyjściowego stężenia w badanej próbce. Technika wykorzystuje barwniki fluorescencyjne (np. SYBR Green) lub specyficzne sondy znakowane fluorochromami (np. sondy TaqMan), które umożliwiają ciągły pomiar produktu podczas amplifikacji.

Zastosowania kliniczne qPCR obejmują m.in.: diagnostykę chorób zakaźnych (wykrywanie i oznaczanie miana wirusów, bakterii, grzybów), monitorowanie minimalnej choroby resztkowej w nowotworach, badania ekspresji genów (po odwrotnej transkrypcji RNA do cDNA – technika RT-qPCR), diagnostykę prenatalną oraz identyfikację polimorfizmów pojedynczych nukleotydów (SNP). Metoda charakteryzuje się wysoką czułością, specyficznością oraz szerokim zakresem dynamicznym, pozwalając na wykrycie nawet pojedynczych kopii poszukiwanej sekwencji.

Powiązane wpisy

  1. 09.04.2026
  2. www.leksykon.com.pl