test Ouchterlony’ego
Test Ouchterlony’ego, znany również jako metoda podwójnej immunodyfuzji w żelu, jest techniką immunologiczną służącą do wykrywania i identyfikacji antygenów oraz przeciwciał. Metoda została opracowana przez szwedzkiego bakteriologa Örjana Ouchterlony’ego w latach 40. XX wieku.
W teście Ouchterlony’ego antygeny i przeciwciała dyfundują w płaszczyźnie żelu agarozowego z oddzielnych studzienek wyciętych w żelu. Gdy spotykają się w optymalnych proporcjach, tworzą widoczne linie precypitacji, które mogą być obserwowane gołym okiem. Wzór utworzonych linii dostarcza informacji o liczbie i swoistości układów antygen-przeciwciało.
Test ten jest szczególnie przydatny w diagnostyce chorób autoimmunologicznych, alergii, infekcji oraz w badaniach nad swoistością przeciwciał. Pozwala na ocenę pokrewieństwa antygenowego różnych substancji oraz wykrywanie reakcji krzyżowych. Mimo że współcześnie jest zastępowany przez bardziej czułe metody (ELISA, immunoblotting), pozostaje wartościowym narzędziem w laboratoriach immunologicznych ze względu na prostotę wykonania i niski koszt.
Powiązane wpisy
- Leksykon leków
Przedkliniczne dane o bezpieczeństwie – Berinert 500 500 j.m./ml
Ludzki inhibitor C1-esterazy, będący substancją czynną leku Berinert, jest endogennym białkiem pozyskiwanym z ludzkiego osocza, co przekłada się na korzystny profil bezpieczeństwa. Badania przedkliniczne obejmowały toksyczność ostrą i przewlekłą na modelach zwierzęcych (szczury, myszy), które nie wykazały żadnych objawów toksyczności po podaniu pojedynczej ani wielokrotnej dawki. Testy immunogenności, w tym test in vitro Ouchterlony’ego oraz in vivo PCA u świnek morskich, potwierdziły brak powstawania nowych determinant antygenowych po procesie pasteryzacji. Dodatkowo, badania zakrzepowości in vivo na królikach wykazały brak ryzyka zakrzepicy nawet przy dawkach do 800 j.m./kg masy ciała. Ocena tolerancji miejscowej po podaniu dożylnym, podskórnym, dotętniczym i domięśniowym potwierdziła dobrą tolerancję kliniczną i histologiczną preparatu. Nie przeprowadzono badań przedklinicznych dotyczących wpływu wielokrotnych podań na proces rozmnażania oraz potencjalnego działania kancerogennego ze względu na powstawanie przeciwciał przeciwko ludzkim białkom u zwierząt, co mogłoby zaburzyć wyniki. Berinert dostępny jest w dwóch postaciach: Berinert 500 (500 j.m. inhibitora C1-esterazy w fiolce, 50 j.m./ml po rekonstytucji) oraz Berinert 1500 (1500 j.m. w fiolce, 500 j.m./ml po rekonstytucji). Fakt, że substancja czynna jest fizjologicznym składnikiem osocza, stanowi istotny element korzystnego profilu bezpieczeństwa leku, potwierdzonego w badaniach przedklinicznych.
badanie in vivo, badanie przedkliniczne, determinanta antygenowa, immunogenność, inhibitor C1-esterazy, kancerogenność, pasteryzacja, podanie domięśniowe, podanie dotętnicze, podanie dożylne, podanie podskórne, test Ouchterlony’ego, toksyczność ostra, toksyczność przewlekła, tolerancja miejscowa, zakrzepica, zakrzepowość - Leksykon leków
Przedkliniczne dane o bezpieczeństwie – Beriate 2000 2000 j.m.
Przedkliniczne badania bezpieczeństwa preparatu Beriate, zawierającego ludzki czynnik VIII krzepnięcia, wykazały brak toksyczności ogólnej nawet przy podaniu dawek wielokrotnie przekraczających zalecane dla ludzi w przeliczeniu na kilogram masy ciała. Standardowe badania toksyczności po podaniu wielokrotnym nie zostały przeprowadzone ze względu na wytwarzanie przez zwierzęta przeciwciał przeciwko heterologicznemu białku ludzkiego, co utrudnia interpretację wyników. Badania immunologiczne, w tym test Ouchterlony’ego oraz test biernej anafilaksji skórnej u świnek morskich, nie wykazały zmian w odpowiedzi immunologicznej po procesie ogrzewania preparatu, potwierdzając stabilność immunologiczną Beriate po inaktywacji wirusów. Preparat dostępny jest w dawkach 250, 500, 1000 i 2000 j.m., przy czym po rekonstytucji Beriate 2000 zawiera około 200 j.m./ml czynnika VIII, a jego średnia swoista aktywność wynosi około 400 j.m./mg białka.
- Leksykon substancji czynnych
Czynnik VIII – Przedkliniczne dane o bezpieczeństwie
Przedkliniczne badania bezpieczeństwa ludzkiego czynnika VIII, stosowanego m.in. w preparatach Beriate (dostępnych w dawkach 250, 500, 1000 i 2000 j.m.), wykazały brak toksyczności ostrej nawet przy podaniu dawek wielokrotnie przekraczających zalecane dla ludzi (w przeliczeniu na kg masy ciała). Ze względu na immunogenność białka pochodzenia ludzkiego, standardowe badania toksyczności po podaniu wielokrotnym nie były wykonywane, co wynika z ryzyka indukcji przeciwciał przeciwko heterologicznemu białku u zwierząt. Ocena immunogenności ogrzewanego preparatu czynnika VIII, przeprowadzona metodami immunodyfuzji podwójnej (test Ouchterlony’ego) oraz testem biernej anafilaksji skórnej u świnek morskich, nie wykazała istotnych różnic w odpowiedzi immunologicznej w porównaniu do białka niepoddawanego obróbce termicznej.
bierna anafilaksja skórna, czynnik VIII krzepnięcia, dawka terapeutyczna, heterologiczne białko, immunodyfuzja podwójna, immunogenność, margines bezpieczeństwa, mutagenność, odpowiedź immunologiczna, osoczopochodny czynnik VIII, potencjał mutagenny, potencjał onkogenny, reakcja nadwrażliwości, test Ouchterlony’ego, toksyczność ostra, właściwość antygenowa - Leksykon leków
Przedkliniczne dane o bezpieczeństwie – Beriate 1000 1000 j.m.
Dane przedkliniczne dotyczące bezpieczeństwa preparatu Beriate, zawierającego ludzki czynnik VIII krzepnięcia (FVIII), wskazują na ograniczony zakres badań toksyczności ogólnej i mutagenności, co jest typowe dla produktów osoczopochodnych. Badania toksyczności ostrej wykazały brak objawów toksycznych po podaniu zwierzętom dawek wielokrotnie przekraczających dawkę terapeutyczną stosowaną u ludzi (w przeliczeniu na kg masy ciała), co świadczy o szerokim marginesie bezpieczeństwa. Dodatkowo, testy immunologiczne, w tym test Ouchterlony’ego oraz test biernej anafilaksji skórnej u świnek morskich, nie wykazały istotnych zmian w odpowiedzi immunologicznej po obróbce termicznej preparatu, potwierdzając stabilność immunologiczną Beriate.
badanie genotoksyczności, badanie immunologiczne, bezpieczeństwo długoterminowe, białko heterologiczne, bierna anafilaksja skórna, czynnik VIII krzepnięcia, czynnik VIII osoczopochodny, hemofilia A, koncentrat czynnika VIII, mutagenność, obróbka termiczna, potencjał mutagenny, potencjał onkogenny, test Ouchterlony’ego, toksyczność ogólna, toksyczność po podaniu wielokrotnym, wytwarzanie przeciwciał