izotermalna amplifikacja
Izotermalna amplifikacja to grupa technik molekularnych umożliwiających powielanie kwasów nukleinowych (DNA lub RNA) w stałej temperaturze, w przeciwieństwie do tradycyjnej reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), która wymaga cyklicznych zmian temperatury. Metody te zyskują coraz większe znaczenie w diagnostyce medycznej ze względu na prostotę, szybkość i możliwość stosowania w warunkach o ograniczonych zasobach.
Do najpopularniejszych technik izotermalnej amplifikacji należą: amplifikacja zależna od rekombinazy polimerazy (RPA), amplifikacja przez pętlę izotermiczną (LAMP), amplifikacja z przesunięciem nici (SDA) oraz transkrypcja z odwrotną transkryptazą (NASBA). Każda z tych metod wykorzystuje różne enzymy i mechanizmy molekularne, ale wszystkie działają w stałej temperaturze, zazwyczaj między 37°C a 65°C.
W diagnostyce medycznej izotermalna amplifikacja znajduje zastosowanie w szybkiej identyfikacji patogenów (bakterii, wirusów, grzybów), wykrywaniu mutacji i wariantów genetycznych, diagnostyce chorób zakaźnych oraz w badaniach przesiewowych. Szczególnie wartościowa okazała się podczas pandemii COVID-19, umożliwiając szybkie testy diagnostyczne przy minimalnym wyposażeniu laboratoryjnym.
Powiązane wpisy
- Leksykon chorób i schorzeń
Japońskie zapalenie mózgu – Diagnostyka i diagnoza
Japońskie zapalenie mózgu (JE) jest główną przyczyną wirusowego zapalenia mózgu u dzieci w Azji i regionie zachodniego Pacyfiku, a jego diagnostyka opiera się na ocenie klinicznej oraz badaniach laboratoryjnych. Podejrzenie JE powinno być rozważane u pacjentów z objawami zapalenia mózgu, zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych lub wiotkiego porażenia, którzy przebywali na terenach endemicznych. Diagnostyka laboratoryjna bazuje przede wszystkim na wykrywaniu przeciwciał IgM przeciwko wirusowi JE w płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF) lub surowicy za pomocą testu MAC-ELISA, z czułością około 70% w pierwszym tygodniu i 95% po 10 dniach od początku objawów. Analiza CSF typowo wykazuje umiarkowaną limfocytarną pleocytozę, podwyższone białko oraz prawidłowy lub nieznacznie obniżony stosunek glukozy w CSF do osocza. Metody molekularne, takie jak RT-PCR i RT-LAMP, choć mniej czułe z powodu krótkotrwałej wiremii, stanowią uzupełnienie diagnostyki, a badania obrazowe (MRI, CT) wskazują na charakterystyczne zmiany w obrębie wzgórza, jąder podstawy i hipokampa.
amplifikacja kwasów nukleinowych, badanie histopatologiczne, badanie serologiczne, flawiwirus, hodowla wirusa, immunofluorescencja, immunohistochemia, izotermalna amplifikacja, jądra podstawy, japońskie zapalenie mózgu, napad drgawkowy, obrzęk mózgu, odwrotna transkryptaza, ośrodkowy układ nerwowy, ostry zespół zapalenia mózgu, pleocytoza limfocytarna, płyn mózgowo-rdzeniowy, przeciwciała przeciwwirusowe, punkcja lędźwiowa, reakcja łańcuchowa polimerazy, reaktywność krzyżowa, rezonans magnetyczny, test neutralizacji, tomografia komputerowa, wiotkie porażenie, wirus dengi, wirus Zachodniego Nilu, wirusowe zapalenie mózgu, wodogłowie, zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych - Leksykon chorób i schorzeń
Błonica – Diagnostyka i diagnoza
Błonica jest ostrą chorobą zakaźną wywoływaną głównie przez Corynebacterium diphtheriae, charakteryzującą się produkcją toksyny prowadzącej do poważnych powikłań miejscowych i ogólnoustrojowych. Diagnostyka opiera się na obrazie klinicznym, w tym obecności szarobiałej błony rzekomej w gardle, oraz potwierdzeniu laboratoryjnym poprzez hodowlę na podłożach Loefflera, Mueller-Miller tellurite i Tinsdale, identyfikację bakterii, wykrywanie genu toksyny metodą PCR oraz test Eleka, który jest złotym standardem potwierdzającym produkcję toksyny. Okres inkubacji wynosi 1-10 dni, a wczesne objawy to ból gardła, powiększenie węzłów chłonnych i niewysoka gorączka. Poziom przeciwciał ochronnych przeciwko toksynie błoniczej wynosi ≥0,10 IU/ml. W diagnostyce uzupełniającej stosuje się RTG klatki piersiowej i szyi, EKG oraz badania serologiczne, choć te ostatnie nie służą do rozpoznania ostrego zakażenia.
antybiotykoterapia, antytoksyna błonicza, badania serologiczne, błona rzekoma, błonica, błonica skórna, CDC, corynebacterium, Corynebacterium diphtheriae, diagnostyka obrazowa, hodowla bakteryjna, immunoprecypitacja, izotermalna amplifikacja, neuritis, PCR, PCR w czasie rzeczywistym, podłoże hodowlane, przeciwciała przeciwbłonicze, test immunochromatograficzny, test immunoenzymatyczny, toksoid błoniczy, węzły chłonne szyjne, zapalenie mięśnia sercowego