Giardioza
Diagnostyka i diagnoza
Giardiaza to infekcja przewodu pokarmowego wywołana przez pasożyta Giardia lamblia, diagnozowana głównie poprzez wykrywanie cyst lub trofozoitów w kale. Standardem jest mikroskopia kału, zalecane jest badanie trzech próbek z różnych dni, co zwiększa czułość diagnostyczną do ponad 90%. Metody koncentracji kału, takie jak flotacja siarczanem cynku (ciężar właściwy 1,18), poprawiają wykrywalność cyst (9-15 x 7-10 μm). Testy immunoenzymatyczne (ELISA) wykrywające antygen GSA65 cechują się czułością 95-100% i swoistością 100%, stanowiąc alternatywę lub uzupełnienie mikroskopii. Diagnostyka molekularna (real-time PCR) wykazuje najwyższą czułość (>95%), zdolna wykryć nawet 10 pasożytów/100 μl, jednak jest kosztowna i ograniczona dostępnością. Mikroskopia bezpośrednia ma czułość 34-50% dla pojedynczej próbki, a metody koncentracji 65-90% dla trzech próbek. Immunofluorescencja bezpośrednia (DFA) to złoty standard (>90% czułości), ale wymaga specjalistycznego sprzętu.
Diagnostyka giardiazy
Giardiaza, znana również jako giardioza lub zakażenie Giardia, to infekcja przewodu pokarmowego wywołana przez jednokomórkowego pasożyta zwanego Giardia lamblia (G. intestinalis, G. duodenalis). Jest jedną z najczęstszych przyczyn chorób przenoszonych przez wodę w Stanach Zjednoczonych i na całym świecie.12 Skuteczna diagnostyka jest kluczowa dla wdrożenia odpowiedniego leczenia i zapobiegania rozprzestrzenianiu się pasożyta.
Tradycyjne metody diagnostyczne
Tradycyjną podstawą diagnostyki giardiazy jest identyfikacja trofozoitów lub cyst Giardia intestinalis w kale zakażonych pacjentów za pomocą badania kału na obecność pasożytów (stool ova and parasite, OP). Jednak w ostatnich latach nastąpił wzrost zastosowania bardziej obiektywnych technik diagnostycznych (np. immunoassays, techniki amplifikacji kwasów nukleinowych – NAAT), które zastępują te opierające się na subiektywnym badaniu mikroskopowym próbek kału.34
Badanie mikroskopowe kału pozostaje nadal powszechnie stosowaną metodą diagnostyczną. Może być wykonywane na świeżych próbkach lub po konserwacji alkoholem poliwinylowym lub 10% formaliną (z odpowiednim barwieniem). Idealnie, powinny być zbadane trzy próbki z różnych dni, ze względu na potencjalne wahania w wydalaniu cyst z kałem. Giardia intestinalis jest identyfikowana u 50-70% pacjentów po pojedynczym badaniu kału i u ponad 90% po trzech badaniach kału.56
Metody koncentracji kału
Koncentracja kału jest zalecaną i rutynową procedurą, która umożliwia wykrycie małej liczby cyst Giardia, które mogłyby zostać pominięte przy użyciu bezpośredniego rozmazu. Porównanie bezpośredniego rozmazu i technik koncentracji formalno-eterowej w diagnostyce pasożytów jelitowych wykazało, że technika koncentracji formalno-eterowej wykryła 65,26% pozytywnych próbek dla jednego lub więcej pasożytów jelitowych, podczas gdy bezpośredni rozmaz wilgotny miał czułość tylko 34,74%.7
Znaczna liczba zakażonych osób może zostać pominięta przy użyciu metody bezpośredniego rozmazu mokrego. Cysty Giardia są owalne (9-15 x 7-10 μm) i mogą być wykryte w kale skoncentrowanym techniką wirowania-flotacji przy użyciu siarczanu cynku (ciężar właściwy 1,18).89
Testy immunologiczne
Testy immunodiagnostyczne dla Giardia obejmują techniki immunoenzymatyczne, takie jak ELISA do wykrywania przeciwciał oraz metody zależne od wykrywania antygenów Giardia intestinalis w próbkach kału ludzkiego. Ogólny wniosek z badań, z pewnymi wyjątkami, jest taki, że testy immunoenzymatyczne są bardziej czułe lub tak samo czułe jak mikroskopowe badanie kału.10
Jednym z najlepszych antygenów, które kiedykolwiek zostały użyte, jest antygen kałowy Giardia o względnej masie cząsteczkowej 65 kDa (GSA65), który występuje zarówno w trofozoitach, jak i cystach. Zgłaszana czułość Elisa-GSA65 dla pojedynczej próbki waha się między 95 a 100% przy 100% swoistości.11
Testy na antygen kałowy ELISA są dostępne i mogą być metodą z wyboru. Testy te są podobne do testu kału OP pod względem kosztów i mają czułość 88-98% oraz swoistość 87-100%. Jeśli wyniki z trzech testów OP są negatywne, a nadal podejrzewa się giardiazę, test antygenu kałowego ELISA może być pomocny.1213
Techniki molekularne
Diagnostyka molekularna giardiazy nie jest używana w rutynowych laboratoriach medycznych. Jednak PCR w czasie rzeczywistym (real-time PCR) wykazał większą czułość i korzyści niż ELISA i mikroskopia kałowa w diagnozowaniu infekcji G. intestinalis.14
Techniki PCR mogą wykryć Giardia w próbkach kału o stężeniach pasożytów tak niskich jak 10 pasożytów/100 μl. Dobrze wiadomo, że żadna tradycyjna lub nowa metoda nie może wykryć wszystkich przypadków infekcji Giardia.1516
Techniki amplifikacji kwasów nukleinowych (NAATs), takie jak PCR, są obecnie szeroko stosowane. Umożliwiają one bezpośrednie wykrywanie DNA Giardia z próbek kału i wykazują godną pochwały czułość i specyficzność.1718
Test sznurkowy i endoskopia
Test sznurkowy (Entero-test) polega na połknięciu kapsułki żelatynowej zawierającej nylonowy sznurek z przymocowanym do niego ciężarkiem. Wolny koniec sznurka jest przyklejony do policzka pacjenta. Po połknięciu sznurek gromadzi wydzieliny i śluz z jelita cienkiego. Po czterech godzinach sznurek jest wyciągany i badany pod kątem obecności organizmów.1920
Ezofagogastroduodenoskopia (EGD) może być stosowana u pacjentów, u których diagnoza jest podejrzewana, ale niepotwierdzona po mikroskopii kału i teście ELISA. Biopsja może być również wykorzystana do wizualizacji zmian w cechach histologicznych. Biopsja jelita wykazuje spłaszczenie, łagodną infiltrację limfocytów i trofozoity na powierzchni. Nie ma klasycznych uniwersalnych nieprawidłowości histologicznych wynikających z infekcji G. intestinalis.2122
Zalecenia diagnostyczne
Kiedy podejrzewać giardiazę
Giardiazę należy podejrzewać u pacjentów z objawami takimi jak wodnista biegunka, bóle brzucha, wzdęcia, utrata masy ciała i zmęczenie, szczególnie jeśli występował kontakt z potencjalnie skażoną wodą lub w przypadku ognisk epidemicznych.2324
Objawy giardiazy mogą się różnić od bezobjawowego wydalania cyst do ostrej samoograniczającej się biegunki lub przewlekłej biegunki. U dzieci zakażenie może być związane z zahamowaniem wzrostu.2526
Strategia diagnostyczna
Centra Kontroli i Zapobiegania Chorobom (CDC) zalecają pobieranie trzech próbek kału od pacjentów w ciągu kilku dni dla uzyskania dokładnych wyników testu. Mikroskopia z bezpośrednim testem przeciwciał fluorescencyjnych (DFA) jest złotym standardem w diagnostyce giardiazy. Znalezienie Giardia w kale pacjenta potwierdza, że ma on infekcję Giardia.2728
Wykazano, że testy ELISA do wykrywania antygenu kałowego są bardziej czułe niż badanie mikroskopowe. Testy molekularne na obecność DNA pasożyta w kale są również dostępne. Ponieważ pasożyty Giardia są wydalane okresowo, pobieranie wielu próbek kału zwiększa prawdopodobieństwo wykrycia infekcji.2930
Standardowe badania laboratoryjne (np. pełna morfologia krwi, poziomy elektrolitów) są często nieistotne. Ponieważ poziomy immunoglobuliny G (IgG) pozostają podwyższone przez długi czas, nie są one korzystne w diagnostyce ostrej giardiazy. Surowicze przeciwciała anty-Giardia klasy immunoglobuliny M (IgM) mogą być przydatne w rozróżnieniu między ostrymi infekcjami a przeszłymi infekcjami.31
Czułość i specyficzność testów
Czułość technik mikroskopowych zależy od zastosowania metod bezpośrednich lub koncentracji, liczby zbadanych próbek kału i zatrudnienia profesjonalnie przeszkolonych osób. Wykrywanie Giardia za pomocą mikroskopii może być trudne, ponieważ pasożyty są wydalane tylko okresowo. Czułość mikroskopii można zwiększyć, zbierając 3 próbki kału w różne dni.3233
Testy ELISA wykazują godną pochwały czułość i specyficzność (85-98%), ale mają pewne istotne wady, w tym wysokie koszty i konieczność posiadania dodatkowego sprzętu, takiego jak czytnik ELISA. Gdy te testy są łączone z metodami mikroskopowymi, czułość wzrasta do 97,8%.3435
Postępowanie po diagnozie
Monitorowanie leczenia
Testy kału mogą być również wykorzystane do monitorowania skuteczności leczenia. Badania kontrolne powinny być wykonywane 24-48 godzin po zakończeniu terapii, jeśli objawy kliniczne nie ustąpiły. Zaleca się wykonanie flotacji kału z wirowaniem głównie w celu wykrycia cyst w kale stałym lub półstałym.3637
Testy ELISA i PCR mogą pozostać pozytywne nawet po leczeniu przez różne okresy czasu i nie powinny być używane jako wskaźnik do określenia ponownego zakażenia lub niepowodzenia leczenia. W przypadku utrzymujących się objawów przez dłużej niż sześć tygodni należy skontaktować się z lekarzem.3839
Zgłaszanie przypadków
Pracownicy służby zdrowia i laboratoria powinni zgłaszać przypadki potwierdzone laboratoryjnie do lokalnego lub stanowego wydziału zdrowia. Giardiaza jest chorobą podlegającą zgłoszeniu w wielu krajach, w tym w Stanach Zjednoczonych.4041
Specjalne grupy pacjentów
Ciężarne
Nie ma konsekwentnie zalecanych leków na zakażenie Giardia w ciąży ze względu na potencjalne szkodliwe działanie leku na płód. Jeśli objawy są łagodne, lekarz może zalecić opóźnienie leczenia do końca pierwszego trymestru lub dłużej. Jeśli leczenie jest konieczne, należy omówić z lekarzem najlepszą dostępną opcję leczenia.42
Dzieci
Giardiaza jest częstsza u dzieci niż u dorosłych. U dzieci może prowadzić do opóźnienia wzrostu. Wskaźnik bezobjawowego nosicielstwa u dzieci może wynosić do 20% w południowych regionach i u dzieci poniżej 36. miesiąca życia, które uczęszczają do żłobków. Nosicielstwo bezobjawowe może utrzymywać się przez kilka miesięcy.4344
Pracownicy służby zdrowia i osoby związane z żywnością
Osoby zajmujące się żywnością, pracownicy służby zdrowia i dzieci w przedszkolach muszą uzyskać zgodę od Departamentu Zdrowia, zanim będą mogły wrócić do pracy lub szkoły. Wiąże się to z kontrolnymi badaniami kału.45
Wyzwania diagnostyczne
Trudności w diagnozowaniu
Istnieje kilka czynników utrudniających szybką diagnozę infekcji Giardia w krajach uprzemysłowionych. Giardiaza może zatem pozostać niezdiagnozowana lub może być niewłaściwie leczona przez lekarzy, którzy nie są zaznajomieni z tą chorobą. Rozproszone doniesienia podkreślają potrzebę zwiększenia wysiłków na rzecz edukacji wśród lekarzy ogólnych i pediatrów, aby byli świadomi Giardia jako przyczyny lokalnych przypadków biegunki oraz sposobów ich diagnozowania i skutecznego leczenia.4647
Jeśli podejrzewa się Giardia, musi być zamówiona i wysłana do laboratorium właściwa próbka i konkretne testy, gdzie dostępne są odpowiednie narzędzia diagnostyczne i umiejętności. Do diagnostyki laboratoryjnej najczęściej stosowaną metodą jest mikroskopowe określenie morfologiczne, które jest proste i szybkie. Niestety, jest mniej czułe, wymaga badania wielu próbek i procedur koncentracji oraz musi być wykonywane przez dobrze wyszkolonych techników.48
Przypadki wymagające szczególnej uwagi
Odkrycie Giardia jako przyczyny dużego ogniska epidemicznego przenoszonego przez wodę w Bergen w Norwegii zostało opóźnione z powodu braku historii podróży zagranicznych wśród wielu pacjentów szukających pomocy medycznej z powodu choroby biegunkowej. Ta infekcja może również przebiegać z lub bez zaburzeń wchłaniania, skurczów brzucha, nudności, wymiotów, zwiększonej flatulencji i utraty masy ciała.4950
Zmieniające się perspektywy zachorowalności i częstości występowania giardiazy w krajach uprzemysłowionych, gdzie jest nadal stosunkowo zaniedbywana i niedoceniana przez praktykujących klinicystów i być może przez opiekunów, muszą być brane pod uwagę. Giardiaza może przekraczać obecne szacunki częstości występowania.51
Zalecenia dla praktyki klinicznej
Optymalne strategie diagnostyczne
Opierając się na dostępnych danych, zaleca się stosowanie mikroskopowych metod koncentracji jako podstawowej modalności w warunkach klinicznych, biorąc pod uwagę ich liczne zalety, w tym niski koszt i brak potrzeby specjalistycznego sprzętu. W przypadkach, gdy wynik negatywny utrzymuje się mimo objawów wskazujących, uzasadnione jest zastosowanie metody ELISA, biorąc pod uwagę jej zwiększoną czułość.52
Wykorzystanie PCR byłoby bardziej uzasadnione w charakteryzowaniu odpornych gatunków i szczepów, choć jest utrudnione przez jego wysoki koszt. Systematyczny przegląd podejść diagnostycznych dla giardiazy ludzkiej wskazuje, że mikroskopowe techniki, szczególnie metoda Ritchiego, stanowią podstawowy wybór, a następnie ELISA i PCR.5354
Wskazówki praktyczne
Dla dokładnej diagnozy większość lekarzy zaleca analizę co najmniej 3 próbek pobranych w różnych dniach. Jeśli Giardia lamblia zostanie znaleziona w pierwszym teście (wynik pozytywny), nie są potrzebne kolejne testy. Jeśli podejrzewa się przewlekłą giardiazę, można pobrać 3 próbki kału co 4 do 7 dni, aby zwiększyć szanse znalezienia pasożyta.55
Ważne jest, aby pamiętać, że test antygenu Giardia wykrywa obecność tylko tego konkretnego pasożyta, więc lekarz może zlecić dodatkowe testy, aby postawić ostateczną diagnozę. W niektórych przypadkach, szczególnie gdy próbki kału są wielokrotnie negatywne, ale podejrzenia medyczne są wysokie, lekarz może wykonać ezofagogastroduodenoskopię w celu uzyskania próbki bezpośrednio z pierwszej części jelita cienkiego do badania.5657
Jeśli podejrzewasz, że masz giardiazę lub masz objawy, ważne jest, aby skonsultować się z lekarzem. Mogą oni przeprowadzić Cię przez odpowiedni proces diagnostyczny i w razie potrzeby zalecić leczenie. Samodzielna diagnoza i leczenie nie są zalecane, ponieważ niewłaściwe zarządzanie infekcją może prowadzić do powikłań lub uporczywej infekcji.58
| Metoda diagnostyczna | Czułość | Zalety | Wady |
|---|---|---|---|
| Mikroskopia bezpośrednia | 34-50% (pojedyncza próbka) | Niska cena, prostota wykonania | Niska czułość, wymaga doświadczenia technika |
| Metody koncentracji kału (flotacja) | 65-90% (trzy próbki) | Wyższa czułość niż metoda bezpośrednia, niski koszt | Wymaga specjalnego roztworu i doświadczenia |
| Test ELISA na antygen | 88-98% | Wysoka czułość i specyficzność | Wyższy koszt, wymaga specjalnego sprzętu |
| Immunofluorescencja bezpośrednia (DFA) | >90% (złoty standard) | Najwyższa czułość, łatwa interpretacja | Wymaga mikroskopu fluorescencyjnego |
| PCR | >95% | Wykrywa nawet 10 pasożytów/100 μl, identyfikacja genotypu | Najwyższy koszt, ograniczona dostępność |
| Test sznurkowy (Entero-test) | Zmienna | Bezpośrednie pobieranie z dwunastnicy | Inwazyjny, dyskomfort pacjenta |
| Endoskopia z biopsją | Wysoka | Bezpośrednia wizualizacja, wykrywa inne schorzenia | Najbardziej inwazyjna, wysoki koszt |
Kolejne rozdziały
Zapraszamy do dalszego czytania naszego leksykonu.
Wybierz kolejny rozdział z menu poniżej, aby otworzyć nową podstronę kompedium wiedzy i uzyskać szczegółowe informację o leku, substancji lub chorobie.